Wstępne opracowanie testu diagnostycznego na Brucellę z wykorzystaniem reakcji łańcuchowej polimerazy.

    • W naszym laboratorium trwają prace nad bardzo czułym i specyficznym  testem diagnostycznym  na  Brucellę opartym na łańcuchowej reakcji polimerazy.  Do stworzenia starterów, które umożliwiły amplifikację fragmentu 635 bp genu białka błony zewnętrznej 43 kDa ze  szczepu 19 Brucella  abortus, zastosowano dostępny w handlu  zestaw do PCR.
    • Pomyślnie zamplifikowaliśmy sklonowany gen obecny w plazmidzie pMS64 i genomowym  DNA Brucella  S19. Amplifikowany DNA był łatwo wykrywany przez elektroforezę w żelu agarozowym. Stosując zarówno plazmid pMS64, jak i Br. Oczyszczony DNA abortus S19 jako matryca, każdy składnik reakcji PCR został dostosowany do optymalnej amplifikacji sekwencji DNA.
    • Optymalna specyficzna amplifikacja zachodziła, gdy temperatura przyłączania starterów wynosiła 60 stopni C. Fragment genu ulegał amplifikacji w 25 różnych   gatunkach i szczepach Brucella . Aby  przetestować  specyficzność reakcji, przebadano DNA wyekstrahowane z 17 mikroorganizmów prawdopodobnie związanych z  bydłem . Nie zaobserwowano amplifikacji.
    • Czułość reakcji określono przy różnych stężeniach   DNA genomowego szczepu Brucella 19. Wykryto zaledwie 0,1 pg DNA (mniej niż 100  komórek brucella ). Specyficzność i czułość PCR w połączeniu z jej prostotą i szybkością sugeruje potencjał tej techniki w rutynowej diagnostyce brucelozy.

    Diagnostyka swoistej brucelozy bydła na podstawie specyficznej dla antygenu produkcji interferonu gamma in vitro.

    1. W celu poprawy swoistości diagnostyki brucelozy bydła opracowaliśmy test , który można uznać za korelat in vitro testu  nadwrażliwości typu opóźnionego   (DTH).
    2. Mieszanina białek cytoplazmatycznych z  Brucella  melitensis B115 została użyta jako specyficzny bodziec antygenowy w hodowli pełnej krwi bydlęcej. Supernatanty zebrane w 18 do 24 godzin po bodźcu antygenowym in vitro testowano pod kątem zawartości interferonu gamma (IFN-gamma) przy użyciu komercyjnego zestawu do testu immunosorpcyjnego typu sandwich z wiązaniem enzymatycznym  .
    3. Test IFN-gamma oceniano na 10 jałówkach w trakcie (80 dni) zakażenia doświadczalnego oraz na 14 krowach z trwającej epidemii brucelozy.
    4. Wszystkie te zwierzęta poddano ubojowi, a odpowiednie narządy poddano klasycznym analizom bakteriologicznym. Ponadto przeanalizowaliśmy 23 przypadki terenowe, w których wystąpiły fałszywie dodatnie reakcje serologiczne.
    5. Wyniki IFN-gamma porównano z wynikami standardowej DTH i zestawu testów serologicznych i skorelowano z danymi bakteriologicznymi.
    6. Zarówno w przypadku zakażenia doświadczalnego , jak i epidemii brucelozy w terenie , test IFN-gamma wykrył zakażenie u większej liczby zwierząt niż jakakolwiek kombinacja testów serologicznych  i wykrył zakażenie wcześniej niż te  testy .
    7. Wreszcie, żadna z próbek od krów wykazujących fałszywie dodatnie reakcje serologiczne nie została zaklasyfikowana jako dodatnia w teście IFN-gamma podczas testowania jego specyficzności i przydatności w interpretacji niejednoznacznych wyników serologicznych. Test IFN-gamma, szybka i wygodna alternatywa dla DTH, wydaje się być idealną metodą uzupełniającą protokoły diagnostyki serologicznej.

    Gronkowce w chorobach przyzębia człowieka.

    • Występowanie gronkowców poddziąsłowych stwierdzono u 506 osób z zaawansowanym zapaleniem przyzębia dorosłych, 108 z wczesnym zapaleniem przyzębia, 13 z miejscowym młodzieńczym zapaleniem przyzębia, 18 z zapaleniem dziąseł i 13 z uszkodzonymi implantami tytanowymi osseointegrowanymi.
    • Próbki poddziąsłowe pobrano ćwiekami papierowymi i przetransportowano w VMGA III. Próbki bakteryjne wysiano na podłoże Staphylococcus 110, które inkubowano w 10% CO2 oraz na wzbogacony  agar z krwią brucella  , który inkubowano w warunkach beztlenowych.
    • Izolaty gronkowców od 94 dorosłych pacjentów z zapaleniem przyzębia określono przy użyciu zestawu mikrometod API STAPH Trac  i testu  lateksowego Bacto Staph aglutynacji   na aktywność koagulazy.
    • Staphylococcus epidermidis stanowił 45,8%, a Staphylococcus aureus 22,3% wszystkich izolatów gronkowców. Przy stężeniu 1 mikrograma/ml stwierdzono oporność gronkowców in vitro na tetracyklinę (14,4% izolatów), penicylinę (4,9%), erytromycynę (12,1%) i metronidazol (31,9%). Gronkowce poddziąsłowe izolowano od około 50% pacjentów z zapaleniem dziąseł i przyzębia.
    • Nie stwierdzono statystycznie istotnych różnic między tymi grupami pacjentów w częstości występowania lub średnim odsetku odzyskanych gronkowców. Zmiany typu „periimplantitis” charakteryzowały się istotnie większym odsetkiem gronkowców (15,1%) niż zmian związanych z zapaleniem dziąseł (0,06%) lub zapaleniem przyzębia (1,2%). Staphylococci mogą odgrywać rolę w niektórych uszkodzonych implantach dentystycznych z osteointegracją.

    Dowody na niewidoczne  zakażenia Brucella  canis wśród dorosłych z zawodową ekspozycją na psy.

    1. Testy serologiczne na ludziach zaprojektowane do wykrywania brucelozy będą pomijać infekcje wywołane przez  Brucella  canis, a niski poziom okresowej bakteriemii ogranicza diagnozę przez posiew krwi . Niedawne epidemie B. canis u psów i współistniejące choroby u opiekunów sugerują, że mogą wystąpić niewidoczne infekcje u ludzi.
    2. Przy ponad ćwierć miliona osób wykonujących zawody z udziałem psów i prawie 80 milionach właścicieli psów w Stanach Zjednoczonych, patogen ten jest niedocenianym zagrożeniem dla zdrowia ludzkiego.
    3. Aby zbadać narażenie zawodowe na B. canis, zaadaptowaliśmy komercyjny test serologiczny psów i przedstawiliśmy pierwsze w ostatnich latach kontrolowane badanie seroepidemiologiczne nad zakażeniami ludzkimi B. canis.
    4. Do badania włączono 306 dorosłych z narażeniem zawodowym na psy i 101 niedopasowanych osób nienarażonych na kontakt z psami. Przeciwciała wykrywano za pomocą zestawu do szybkiego szkiełkowego testu aglutynacji psów D-Tec CB  (RSAT)   z wtórnym 2-merkaptoetanolem (ME)-RSAT.
    5. Wyniki zostały zweryfikowane na ślepym podzbiorze surowic z dodatkowym RSAT i pośrednim testem immunoenzymatycznym w Narodowej Administracji Laboratoriów i Instytutów Zdrowia (ANLIS) w Argentynie. Seroprewalencja wahała się od 10,8% (RSAT) do 3,6% (ME-RSAT) wśród osób narażonych na działanie psów.
    6. Pracownicy hodowli byli bardziej skłonni do  testu  seropozytywnego RSAT w porównaniu z innymi psimi ekspozycjami (OR = 2,7; 95% CI, 1,3-5,8); jednak niska seroprewalencja ograniczała istotne analizy czynników ryzyka zawodowego.
    7. Dwóch uczestników seropozytywnych zgłosiło objawy zgodne z brucelozą i narażenie na psy zarażone B. canis; jednak nie można było określić czasowości wystąpienia objawów w przypadku zgłoszonego narażenia. Wyniki D-Tec CB były zasadniczo zgodne z testami ANLIS (kappa Cohena = 0,60-0,68).
    8. Dane te uzupełniają rosnącą literaturę sugerującą, że ludzie zawodowo narażeni na kontakt z psami mogą być narażeni na niewidoczną infekcję B. canis. Rozsądne wydaje się uznanie B. canis za problem zdrowia publicznego w miejscu pracy i zachęcanie do opracowywania testów serologicznych do wykrywania ludzkich zakażeń B. canis.
    Diagnostyka brucelozy człowieka w Egipcie metodą reakcji łańcuchowej polimerazy.
    Celem tego badania było ustalenie dokładnej i czułej techniki reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) do diagnozowania aktywnej brucelozy u ludzi w Egipcie. Nie udało nam się wyekstrahować   DNA  Brucella komercyjnym zestawem , ale  zestaw do ekstrakcji  zaprojektowany we własnym zakresie przy użyciu 2 zestawów starterów [B4/B5 (223 pz) i JPF/JPR (193 pz)] okazał się skuteczny i bardziej ekonomiczny. Technika wykazała wysoką czułość, specyficzność i dokładność.

    Brucella Antibody Rapid Test Kit

    abx092069-40tests Abbexa 40 tests 356 EUR

    Rapid Bovine Brucella Ab Test Kit

    RB23-01-DD Bionote 1 kit/10 tests 151.79 EUR

    Goat Brucella Antibody Rapid Test Kit

    abx092070-40tests Abbexa 40 tests 356 EUR

    Cow Brucella Antibody Rapid Test Kit

    abx092071-40tests Abbexa 40 tests 356 EUR

    NATtrol Zika Virus Stock (Qualitative) (1 mL)

    TEST Zeptometrix 1 mL 1106.64 EUR

    NDV rapid test kit

    RG15-03 Bionote 1 box 139.05 EUR

    Melamine Rapid Test Kit

    abx092011-50tests Abbexa 50 tests 370 EUR

    Accu-Tell COVID-19 IgG/IgM Rapid Test

    GEN-B352-20tests Accu test 20 tests 236 EUR

    Accu-Tell COVID-19 IgG/IgM Rapid Test

    GEN-B352-40tests Accu test 40 tests 321 EUR

    Frit Kit

    FRIT-KIT Next Advance 1each 124 EUR

    Column Packing Kit

    PACK-KIT Next Advance 1pack 1035 EUR

    PCR Mycoplasma Detection Kit

    M034-Kit TOKU-E Kit 266 EUR

    Tetrodotoxin (TTX) ELISA Test Kit

    DEIANJ48 Creative Diagnostics 96T 1625 EUR

    PCRAgH5 AIV Detection Test Kit

    PD55-02 Bionote 1 kit 902.47 EUR

    Rapid Leishmania Ab Test Kit

    RB2104 Bionote 1 box 127 EUR

    Rapid PED Ag Test Kit

    RG14-01 Bionote 1 box 159.9 EUR

    Melamine (MEL) Rapid Test Kit

    abx092057-50tests Abbexa 50 tests 370 EUR

    Clenbuterol (CLE) Rapid Test Kit

    abx092058-50tests Abbexa 50 tests 244 EUR

    Ractopamine (RAC) Rapid Test Kit

    abx092059-50tests Abbexa 50 tests 244 EUR

    Salbutamol (SAL) Rapid Test Kit

    abx092060-50tests Abbexa 50 tests 244 EUR

    Tetracycline (TCs) Rapid Test Kit

    abx092063-50tests Abbexa 50 tests 398 EUR

    Sulfonamides (Sas) Rapid Test Kit

    abx092064-40tests Abbexa 40 tests 398 EUR

    Quinolones (QNs) Rapid Test Kit

    abx092065-40tests Abbexa 40 tests 398 EUR

    Ciprofloxacin (CPFX) Rapid Test Kit

    abx092066-50tests Abbexa 50 tests 398 EUR

    Quinolones (QNs) Rapid Test Kit

    abx092067-40tests Abbexa 40 tests 398 EUR

    Antibody ISOTYPING TEST KIT (OKSA11303)

    OKSA11303 Aviva Systems Biology 10 Tests 780 EUR

    DNASE TEST AGAR

    D04-101-10kg Alphabiosciences 10 kg Ask for price

    DNASE TEST AGAR

    D04-101-2Kg Alphabiosciences 2 Kg Ask for price

    DNASE TEST AGAR

    D04-101-500g Alphabiosciences 500 g Ask for price

    DERMATOPHYTE TEST AGAR

    D04-107-10kg Alphabiosciences 10 kg 849 EUR

    DERMATOPHYTE TEST AGAR

    D04-107-2Kg Alphabiosciences 2 Kg 224 EUR

    DERMATOPHYTE TEST AGAR

    D04-107-500g Alphabiosciences 500 g 97 EUR

    MOTILITY TEST MEDIUM

    M13-121-10kg Alphabiosciences 10 kg 1528 EUR

    MOTILITY TEST MEDIUM

    M13-121-2Kg Alphabiosciences 2 Kg 371 EUR

    MOTILITY TEST MEDIUM

    M13-121-500g Alphabiosciences 500 g 137 EUR

    SAM Test Strip

    TS00201s-30 Arthus 30 tests 416 EUR

    SAH Test Strip

    TS00301s-30 Arthus 30 tests 504 EUR

    HCY Test Strip

    TS00401s-30 Arthus 30 tests 553 EUR

    SNYDER TEST AGAR

    S19-119-10kg Alphabiosciences 10 kg 1049 EUR

    SNYDER TEST AGAR

    S19-119-2Kg Alphabiosciences 2 Kg 267 EUR

    SNYDER TEST AGAR

    S19-119-500g Alphabiosciences 500 g 109 EUR

    Cas9 Protein and T7 gRNA SmartNuclease Synthesis Kit

    CAS400A-KIT SBI 1 kit (10 rxn) 1110 EUR

    2019-nCoV IgG/IgM Rapid Test Cassette (Whole Blood/Serum/Plasma)

    GEN-402-25tests All test 25 tests 244 EUR

    CMV-hspCas9-T2A-Puro SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV100PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    CMV-hspCas9-EF1-GFP SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV105PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    MSCV-hspCas9-T2A-Puro SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV120PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    MSCV-hspCas9-EF1-GFP SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV125PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + EF1-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector

    CAS700A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + CAG-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector

    CAS720A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + CMV-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector

    CAS740A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    T7 gRNA SmartNuclease Synthesis Kit (includes CAS510A-1 & T7 IVT synthesis reagents)

    CAS510A-KIT SBI 1 Kit 805 EUR

    Anigen Rapid FIV Ab Test Kit

    RB22-01-DD Bionote 10 tests/Kit 129.8 EUR

    Rapid Bovine TB Ab Test Kit

    RB23-02-DD Bionote 1 box 128.4 EUR

    Rapid FMD NSP Ab Test Kit

    RB28-02-DD Bionote 1 box 135.4 EUR

    AgRapidFeLV Ag/FIV Ab Test Kit

    RC12-04 Bionote 10 tests/kit 170.4 EUR

    Ag rapid CDV Ag Test Kit

    RG11-03 Bionote 1 box 138.2 EUR

    Rapid TGE/PED Ag Test Kit

    RG14-03 Bionote 1 box 240.85 EUR

    Ag Rapid AIV Ag Test Kit

    RG15-01 Bionote 1 box/30 tests 267 EUR

    Ag Rapid H5AIV Ag test kit

    RG15-05 Bionote 1 box 463 EUR

    Clenbuterol Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092040-50tests Abbexa 50 tests 272 EUR

    Ractopamine Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092042-50tests Abbexa 50 tests 300 EUR

    Salbutamol Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092043-50tests Abbexa 50 tests 342 EUR

    Chloramphenicol Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092045-50tests Abbexa 50 tests 356 EUR

    Quinolones Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092046-50tests Abbexa 50 tests 537 EUR

    Sulfonamides Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092047-50tests Abbexa 50 tests 551 EUR

    Tetracycline Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092048-50tests Abbexa 50 tests 467 EUR

    Zearalenone Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092051-50tests Abbexa 50 tests 411 EUR

    Deoxynivalenol Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092052-50tests Abbexa 50 tests 467 EUR

    Deoxynivalenol Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092053-50tests Abbexa 50 tests 467 EUR

    Aflatoxin Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092054-50tests Abbexa 50 tests 398 EUR

    Zearalenone Rapid Test Kit (Colloidal gold)

    abx092056-50tests Abbexa 50 tests 425 EUR

    Pig Parvovirus Antibody Rapid Test Kit

    abx092074-50tests Abbexa 50 tests 321 EUR

    Rat Antibody ISOTYPING TEST KIT (OKSA11304)

    OKSA11304 Aviva Systems Biology 10 Tests 924 EUR

    Cas9 Nickase: CMV-hspCas9(D10A)-T2A-Puro SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV200PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    Cas9 Nickase: CMV-hspCas9(D10A)-EF1-GFP SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV205PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    Cas9 Nickase: MSCV-hspCas9(D10A)-T2A-Puro SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV220PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    Cas9 Nickase: MSCV-hspCas9(D10A)-EF1-GFP SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit

    CASLV225PA-KIT SBI 1 Kit 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: EF1-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector

    CAS750A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: CAG-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector

    CAS770A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: CMV-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector

    CAS790A-KIT SBI 10 rxn 1132 EUR

    Cas9 SmartNuclease Extra Ligation Kit [includes 5x ligation buffer (10 ul) and Fast ligase (2.5ul)]

    CAS9LIG-KIT SBI 1 Kit 153 EUR

    PinPoint-FC 293T Platform Kit for Targeted Gene Insertion (includes PIN320A-1, PIN200A-1, PIN510A-1 & PIN600A-1)

    PIN320A-KIT SBI 1 Kit 4941 EUR

    PinPoint-FC Murine iPSC Platform Kit for Targeted Gene Insertion (includes PIN340iPS-1, PIN200A-1, PIN510A-1 & PIN600A-1)

    PIN340iPS-KIT SBI 1 Kit 4941 EUR

    Brucella Antibody ELISA Kit

    RK04106 Abclonal 96T 521 EUR

    Brucella suis PCR kit

    PCR-H503-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella suis PCR kit

    PCR-H503-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella melitensis PCR kit

    PCR-V205-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella melitensis PCR kit

    PCR-V205-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella ovis PCR kit

    PCR-V317-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella ovis PCR kit

    PCR-V317-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella canis PCR kit

    PCR-VH075-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella canis PCR kit

    PCR-VH075-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella abortus PCR kit

    PCR-VH184-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella abortus PCR kit

    PCR-VH184-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella spp. PCR kit

    PCR-VH200-48D Bioingentech 50T 453 EUR

    Brucella spp. PCR kit

    PCR-VH200-96D Bioingentech 100T 572 EUR

    Brucella IgG ELISA Kit

    DEIA320 Creative Diagnostics 96T 611 EUR

    Brucella IgA ELISA Kit

    DEIA321 Creative Diagnostics 96T 611 EUR

    Brucella IgM ELISA Kit

    DEIA322 Creative Diagnostics 96T 611 EUR

    Cow Brucella ELISA Kit

    abx055570-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR
    Dodatni wynik PCR wzrastał znacząco wraz ze wzrostem mian seropozytywności w standardowym  teście aglutynacji probówkowej  i wykazywał 100% dodatni wynik u pacjentów z dodatnimi posiewami krwi. Zalecamy stosowanie PCR jako alternatywy dla hodowli w diagnostyce brucelozy.

Leave a Comment