Tożsamość receptora wirusa Epsteina-Barra (EBV) z receptorem dopełniacza typu 2 (CR2) ustalono w trzech zestawach eksperymentów z użyciem przeciwciał monoklonalnych , HB-5 i anty – B2, które rozpoznają błonę limfocytów B Mr 145 000 białko, które jest CR2.
Po pierwsze, porządek rang wiązania fluoresceinowanego EBV z czterema liniami komórek limfoblastoidalnych (SB, JY, Raji i Molt-4) był identyczny z porządkiem rang wiązania HB-5 i anty – B2 w analitycznej cytometrii przepływowej. Po drugie, wstępne traktowanie komórek HB-5, a następnie traktowanie kozim fragmentami F(ab’)2 z mysim IgG blokowało wiązanie fluoresceinowanego EBV na SB, linii komórek B-limfoblastoidalnych.
Przyłączenie wirusa nie było hamowane przez sam HB-5, samo drugie przeciwciało , króliczy receptor anty -C3b lub UPC10 (nieistotne przeciwciało monoklonalne ) . Po trzecie, przeniesienie CR2 z SB do cząsteczek Staphylococcus aureus zawierających białko A, do których został zaabsorbowany HB-5, nadało im specyficzną zdolność do wiązania EBV znakowanego 125I. Dochodzimy do wniosku, że CR2 jest receptorem EBV ludzkich limfocytów B.
Niejednorodność uszkodzeń i napraw DNA wywołanych promieniowaniem w komórkach nowotworowych i normalnych mierzona za pomocą testu „komety”.
- Metodę pomiaru uszkodzeń DNA poszczególnych komórek, opartą na technice mikroelektroforezy, opisali Ostling i Johanson w 1984 (Biochem. Biophys. Res. Commun. 123, 291-298). Komórki osadzone w agarozie poddaje się lizie, krótko poddaje działaniu pola elektrycznego, barwi fluorescencyjnym barwnikiem wiążącym DNA i ogląda pod mikroskopem fluorescencyjnym.
- Uszkodzone DNA migruje dalej w polu elektrycznym, a komórka przypomina wtedy „kometę” z jasno fluorescencyjną głową i ogonem, który zwiększa się wraz ze wzrostem uszkodzeń. Wykorzystaliśmy analizę obrazu wideo, aby zdefiniować odpowiednie „cechy” komety jako miarę uszkodzeń DNA, a także oszacowaliśmy uszkodzenia i naprawy za pomocą promieniowania jonizującego.
- Test został zoptymalizowany pod kątem roztworu do lizy, czasu lizy, czasu elektroforezy i stężenia jodku propidyny przy użyciu komórek V79 chomika chińskiego. Aby ocenić niejednorodność odpowiedzi komórek prawidłowych w porównaniu z komórkami złośliwymi, oceniano uszkodzenie zarówno komórek nowotworowych, jak i komórek prawidłowych w obrębie mysich guzów SCC-VII.
- Komórki nowotworowe oddzielono od makrofagów przy użyciu metody sortowania komórek opartej na zróżnicowanym wiązaniu koziej anty – mysiej IgG sprzężonej z FITC . Najbardziej informacyjną cechą obrazu komety był „moment warkocza”, będący iloczynem ilości DNA w warkoczu i średniej odległości migracji w warkoczu.
- Komórki nowotworowe i normalne wykazywały znaczną niejednorodność uszkodzeń wytworzonych przez promieniowanie jonizujące, chociaż średnia wielkość uszkodzeń wzrastała liniowo wraz z dawką (0-15 Gy) i sugerowała podobną wrażliwość na promieniowanie netto dla tych dwóch typów komórek.
- Podobnie, szybkość naprawy DNA nie różniła się znacząco dla komórek nowotworowych i normalnych, a większość komórek naprawiła uszkodzenie po 30 minutach od ekspozycji na 15 Gy. Niejednorodność odpowiedzi nie wydawała się być wynikiem różnic w odpowiedzi w cyklu komórkowym.
Barwniki Alexa, seria nowych barwników fluorescencyjnych, które dają wyjątkowo jasne, fotostabilne koniugaty.
- Barwniki Alexa 350, Alexa 430, Alexa 488, Alexa 532, Alexa 546, Alexa 568 i Alexa 594 to nowa seria barwników fluorescencyjnych o widmach emisyjnych/wzbudzenia podobnych do widm AMCA, Lucifer Yellow, fluoresceiny, rodaminy 6G, tetrametylorodaminy lub Cy3, lizamina rodamina B i Texas Red, odpowiednio (liczby w nazwach Alexa wskazują przybliżoną maksymalną długość fali wzbudzenia w nm).
- Wszystkie barwniki Alexa i ich koniugaty są bardziej fluorescencyjne i bardziej fotostabilne niż ich powszechnie stosowane analogi spektralne wymienione powyżej. Ponadto barwniki Alexa są niewrażliwe na pH w zakresie 4-10.
- Oceniliśmy barwniki Alexa w porównaniu z konwencjonalnymi barwnikami w zastosowaniach z użyciem różnych koniugatów, w tym koziej anty – mysiej IgG (GAM), streptawidyny, aglutyniny z kiełków pszenicy (WGA) i konkanawaliny A (ConA). Koniugaty Alexa 546 są co najmniej dwukrotnie bardziej fluorescencyjne niż koniugaty Cy3.
- Białka znakowane barwnikami Alexa 568 lub Alexa 594 są kilkakrotnie jaśniejsze niż te same białka znakowane odpowiednio barwnikami lizamina rodamina B lub Texas Red. Pochodne barwnika Alexa falloidyny barwią F-aktynę z wysoką specyficznością. Formy hydrazydowe barwników Alexa są bardzo jasnymi, utrwalanymi w formaldehydzie znacznikami polarnymi.
- Koniugaty fluorochromów Alexa 430 (ex 430 nm/em 520 nm) i Alexa 532 (ex 530 nm/em 548 nm) są spektralnie unikalnymi sondami fluorescencyjnymi o stosunkowo wysokich wydajnościach kwantowych w zakresie długości fali wzbudzenia i emisji.
Synteza interleukin i IgA. Ludzka i mysia interleukina 6 indukują wysoki poziom wydzielania IgA w komórkach B zaangażowanych w IgA.
Świeżo wyizolowane mysie komórki PP B hodowano z 10 różnymi cytokinami, w tym IL-1 alfa, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IFN-gamma, TNF-alfa i TGF- beta, aby zbadać możliwą rolę tych cytokin w indukcji syntezy Ig. Interesujące było odkrycie, że tylko IL-5 i zarówno mysi rekombinant (mr), jak i ludzki rekombinant (hr) IL-6 wzmacniały syntezę IgA.
Efekt był większy z mrIL-6 lub hrIL-6 niż z mrIL-5. IL-6 indukował cykliczne komórki mIgA+ PP B do wydzielania wysokich poziomów IgA (około 7-krotny wzrost w porównaniu z kontrolą). Istotne było odkrycie, że mrIL-6 ma niewielki wpływ na wydzielanie IgM lub IgG przez hodowle komórek PP B. hrIL-6 zwiększyła również wydzielanie IgA przez komórki PP B, a to wzmocnienie zostało zniesione przez kozie anty -hrIL-6 antyserum. mrIL-6 nie powodował proliferacji komórek B, ale indukował gwałtowny wzrost liczby komórek B wydzielających IgA. Przełączanie izotypów nie było mechanizmem tego znacznego wzrostu syntezy IgA, ponieważ komórki B mIgA-PP nie były indukowane do wydzielania IgA przez mrIL-6. Na podstawie tych badań dochodzimy do wniosku, że IL-6 odgrywa ważną rolę w promowaniu końcowego różnicowania komórek PP B w komórki plazmatyczne wydzielające IgA.
Apoptoza złośliwych ludzkich komórek B przez ligację CD20 z przeciwciałami monoklonalnymi.
- CD20 jest nieglikozylowaną fosfoproteiną o masie 33 do 37 kD zaangażowaną w sygnalizację komórek B, która pełni ważne funkcje w regulacji proliferacji i różnicowania komórek B.
- Ponadto, ostatnio wykazano, że ten antygen powierzchniowy komórek B jest skutecznym celem immunoterapii nowotworów złośliwych komórek B przy użyciu chimerycznych ( mysich /ludzkich) lub znakowanych radioaktywnie mysich przeciwciał monoklonalnych anty – CD20 .
- W tym raporcie pokazujemy, że rozległe usieciowanie CD20 za pomocą mysich przeciwciał monoklonalnych anty-CD20 (MoAb) w obecności koziego anty-mysiego IgG lub komórek z ekspresją receptora Fc (FcR) bezpośrednio hamuje proliferację limfocytów B, indukuje jądrowe DNA fragmentacja i prowadzi do śmierci komórki przez apoptozę.
- Efekty apoptotyczne tych MoAb mogą być hamowane przez chelatację zewnątrzkomórkowego lub wewnątrzkomórkowego Ca2+ przez EGTA lub Bapta AM, co wskazuje, że apoptoza za pośrednictwem anty -CD20 może być związana ze zmianami stężenia Ca2+.
Goat IgG (Fc) fragment, purified |
|||
| 20011-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat anti-Rat IgG (Fc) Coated Polystyrene Particles |
|||
| RTPFC-60-5 | Spherotech | 5 mL | 346.8 EUR |
Goat IgG (fc)-Biotin conjugate (isotype control) |
|||
| 20011-Fc-B | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Goat IgG (fc)-FITC conjugate (isotype control) |
|||
| 20011-Fc-F | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Goat IgG (fc)-HRP conjugate (isotype control) |
|||
| 20011-Fc-HP | Alpha Diagnostics | 100 ug | 196.8 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) |
|||
| GAMG80Fc-0100 | Equitech | 100ml | 485.16 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) |
|||
| GAMG80Fc-0500 | Equitech | 500ml | 848.64 EUR |
Mouse IgG (Fc) fragment, purified |
|||
| 20008-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG, unlabeled |
|||
| 40151-UL | Alpha Diagnostics | 1 mg | 255.6 EUR |
Goat anti Mouse IgG Fc (biotin) |
|||
| 43R-1358 | Fitzgerald | 2 mg | 268.8 EUR |
Mouse Anti-Goat IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023336-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023402-5mg | Abbexa | 5 mg | 594 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023405-2mg | Abbexa | 2 mg | 526.8 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023407-2mg | Abbexa | 2 mg | 493.2 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023543-1mg | Abbexa | 1 mg | 627.6 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc, 10MG |
|||
| A008-10MG | Arbor Assays | 10MG | 321.6 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc, 25MG |
|||
| A008-25MG | Arbor Assays | 25MG | 583.2 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc-AP |
|||
| LF-SA8001AP | Abfrontier | 1.0 ml | 398.4 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc-BIOT |
|||
| LF-SA8001B | Abfrontier | 1.0 mg | 313.2 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc-FITC |
|||
| LF-SA8001F | Abfrontier | 1.0 mg | 313.2 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc-UNLB |
|||
| LF-SA8001U | Abfrontier | 1.0 mg | 289.2 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc, 100MG |
|||
| A008-100MG | Arbor Assays | 100MG | 1528 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc, 2MG |
|||
| A008-2MG | Arbor Assays | 2MG | 59 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG Fc, 50MG |
|||
| A008-50MG | Arbor Assays | 50MG | 938 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-Biotin Conjugate |
|||
| 40151-BT | Alpha Diagnostics | 1 ml | 270 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-FITC Conjugate |
|||
| 40151-FITC | Alpha Diagnostics | 1 ml | 270 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-HRP Conjugate |
|||
| 40151-HRP | Alpha Diagnostics | 1 ml | 270 EUR |
Goat Anti-Human IgG FC |
|||
| C020220-1mg | Unibiotest | 1mg | 322.8 EUR |
Goat Anti-Human IgG FC |
|||
| C020220-50mg | Unibiotest | 50mg | 7218 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 70R-IG003 | Fitzgerald | 1 mg | 349.2 EUR |
Goat anti Pig IgG Fc |
|||
| 70R-IG007 | Fitzgerald | 1 mg | 442.8 EUR |
Goat anti Rabbit IgG Fc |
|||
| 70R-IG011 | Fitzgerald | 1.5 mg | 453.6 EUR |
Goat anti Rabbit IgG Fc |
|||
| 70R-IG017 | Fitzgerald | 2 mg | 457.2 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 70-B9039GA00-A0 | Fitzgerald | 5 mg | 165.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 70-S1206GA00-A7 | Fitzgerald | 5 mg | 230.4 EUR |
Goat anti Rabbit IgG Fc |
|||
| 41C-CB1136 | Fitzgerald | 2 mg | 298.8 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc |
|||
| 41R-1013 | Fitzgerald | 1 mg | 225.6 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc |
|||
| 41R-1014 | Fitzgerald | 1 mg | 248.4 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 41R-1125 | Fitzgerald | 1 mg | 225.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 40-IG15 | Fitzgerald | 100 ml | 422.4 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-B9019R000-R0 | Fitzgerald | 10 ml | 159.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-B9039G000-S2 | Fitzgerald | 10 ml | 87.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1203GND0-D0 | Fitzgerald | 5 mg | 230.4 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1203GND1-D0 | Fitzgerald | 10 ml | 230.4 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1211G000-G4 | Fitzgerald | 10 ml | 159.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1211G000-S4 | Fitzgerald | 10 ml | 159.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1211G001-S4 | Fitzgerald | 10 ml | 159.6 EUR |
Goat anti Human IgG Fc |
|||
| 20-S1703GND1-D0 | Fitzgerald | 10 ml | 243.6 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) |
|||
| GAHG80Fc-0100 | Equitech | 100ml | 485.16 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) |
|||
| GAHG80Fc-0500 | Equitech | 500ml | 848.64 EUR |
Human IgG (Fc) fragment, purified |
|||
| 20007-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 249.6 EUR |
Rabbit IgG (Fc) fragment, purified |
|||
| 20009-1-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat IgG (Fc) |
|||
| 31C-CH0504 | Fitzgerald | 2 mg | 519.6 EUR |
Goat IgG Fc |
|||
| 31R-1076 | Fitzgerald | 1 mg | 457.2 EUR |
Gt anti-Hu IgG (Fc) Coated Blue Particles |
|||
| HPBFC-30-5 | Spherotech | 5 mL | 412.8 EUR |
Rabbit IgG (Fc) Coated Fluorescent Particles |
|||
| RGFcP5--10056-3 | Spherotech | 3 mL | 3806.4 EUR |
Sheep IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative |
|||
| 7615-Fc | Alpha Diagnostics | 1 kit | 854.4 EUR |
Horse IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative |
|||
| 7715-Fc | Alpha Diagnostics | 1 kit | 854.4 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) IgG, unlabeled |
|||
| 10119 | Alpha Diagnostics | 1 mg | 242.4 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) IgG, unlabeled |
|||
| 10119-2 | Alpha Diagnostics | 1 mg | 270 EUR |
Goat Anti Mouse Igg (Fc) Polyclonal Antibody |
|||
| CPBT-68074GM | Creative Diagnostics | 1 mg | 795.6 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (Biotin) |
|||
| abx023401-2ml | Abbexa | 2 ml | 693.6 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (FITC) |
|||
| abx023403-2mg | Abbexa | 2 mg | 644.4 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (ALP) |
|||
| abx023404-1ml | Abbexa | 1 ml | 718.8 EUR |
Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (HRP) |
|||
| abx023406-2ml | Abbexa | 2 ml | 718.8 EUR |
Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified |
|||
| 20016-FC | Alpha Diagnostics | 0.5 mg | 300 EUR |
Goat anti-Mouse IgG Coated 384 Well Plate, Clear |
|||
| X125-1EA | Arbor Assays | 1EA | 48 EUR |
Gt anti-Hu IgG (Fc) Coated Blue PMMA Particles |
|||
| HPMAFc-30-5 | Spherotech | 5 mL | 420 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc (biotin) |
|||
| 43R-1080 | Fitzgerald | 1 mg | 342 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc (HRP) |
|||
| 43R-1082 | Fitzgerald | 1 mg | 386.4 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc (rhodamine) |
|||
| 43R-1083 | Fitzgerald | 1 mg | 315.6 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc (biotin) |
|||
| 43R-1086 | Fitzgerald | 1 mg | 386.4 EUR |
Rabbit anti Goat IgG Fc (HRP) |
|||
| 43R-1088 | Fitzgerald | 1 mg | 406.8 EUR |
Goat anti Human IgG, Fc (HRP), |
|||
| 43R-1624 | Fitzgerald | 1 mg | 288 EUR |
Goat anti Human IgG Fc (biotin) |
|||
| 43R-IG017bt | Fitzgerald | 1 ml | 364.8 EUR |
Goat anti Horse IgG Fc (HRP) |
|||
| 43R-IG041hrp | Fitzgerald | 2 ml | 524.4 EUR |
Goat anti Pig IgG Fc (HRP) |
|||
| 43R-IG056hrp | Fitzgerald | 1 mg | 442.8 EUR |
Goat anti Human IgG (Fc) + IgD |
|||
| 20-S5210G000-S4 | Fitzgerald | 10 ml | 230.4 EUR |
Goat Anti-Human IgG Fc Antibody |
|||
| 20-abx134790 | Abbexa |
|
|
Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023409-10mg | Abbexa | 10 mg | 1028.4 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023410-5mg | Abbexa | 5 mg | 594 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023411-2mg | Abbexa | 2 mg | 444 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023507-10ml | Abbexa | 10 ml | 661.2 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023509-2mg | Abbexa | 2 mg | 393.6 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023510-10ml | Abbexa | 10 ml | 444 EUR |
Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx023511-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG (FC) Antibody |
|||
| abx024171-2ml | Abbexa | 2 ml | 727.2 EUR |
Goat anti-Cat IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx401190-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Goat anti-Chicken IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx401199-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Goat anti-Pig IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx401226-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Rabbit anti-Goat IgG (Fc) Antibody |
|||
| abx401456-1mg | Abbexa | 1 mg | 444 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 10MG |
|||
| A009-10MG | Arbor Assays | 10MG | 321.6 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 25MG |
|||
| A009-25MG | Arbor Assays | 25MG | 583.2 EUR |
Donkey Anti-Goat IgG Fc-HRP |
|||
| LF-SA8069H | Abfrontier | 1.0 ml | Ask for price |
Goat Anti-Human IgG FC antibody |
|||
| STJ99582-100l | St John's Laboratory | 100 µl | 109.2 EUR |
Goat Anti-Human IgG FC antibody |
|||
| STJ99582-1mL | St John's Laboratory | 1 mL | 616.8 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 100MG |
|||
| A009-100MG | Arbor Assays | 100MG | 1528 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 2MG |
|||
| A009-2MG | Arbor Assays | 2MG | 59 EUR |
Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 50MG |
|||
| A009-50MG | Arbor Assays | 50MG | 938 EUR |
Mouse anti IgG (Fc) |
|||
| 40R-1010 | Fitzgerald | 500 ug | 678 EUR |
Odkrycia te sugerują, że ligacja CD20 in vivo przez przeciwciała anty – CD20 w obecności komórek z ekspresją FcR może inicjować zdarzenia transdukcji sygnału, które indukują podwyższenie [Ca2+]i i prowadzą do apoptozy złośliwych komórek B, przyczyniając się w ten sposób do imponującego regresje guza obserwowane w modelach mysich i badaniach klinicznych z użyciem MoAb anty -CD20.