Receptorem wirusa Epsteina-Barra ludzkich limfocytów B jest receptor C3d

Tożsamość receptora wirusa Epsteina-Barra (EBV) z receptorem dopełniacza typu 2 (CR2) ustalono w trzech zestawach eksperymentów z użyciem przeciwciał monoklonalnych  , HB-5 i  anty – B2, które rozpoznają błonę limfocytów B Mr 145 000 białko, które jest CR2.

Po pierwsze, porządek rang wiązania fluoresceinowanego EBV z czterema liniami komórek limfoblastoidalnych (SB, JY, Raji i Molt-4) był identyczny z porządkiem rang wiązania HB-5 i  anty – B2 w analitycznej cytometrii przepływowej. Po drugie, wstępne traktowanie komórek HB-5, a następnie traktowanie  kozim  fragmentami F(ab’)2 z  mysim  IgG  blokowało wiązanie fluoresceinowanego EBV na SB, linii komórek B-limfoblastoidalnych.

Przyłączenie wirusa nie było hamowane przez sam HB-5, samo drugie  przeciwciało , króliczy  receptor anty -C3b lub UPC10 (nieistotne przeciwciało monoklonalne  ) . Po trzecie, przeniesienie CR2 z SB do cząsteczek Staphylococcus aureus zawierających białko A, do których został zaabsorbowany HB-5, nadało im specyficzną zdolność do wiązania EBV znakowanego 125I. Dochodzimy do wniosku, że CR2 jest receptorem EBV ludzkich limfocytów B.

Niejednorodność uszkodzeń i napraw DNA wywołanych promieniowaniem w komórkach nowotworowych i normalnych mierzona za pomocą testu „komety”.

  1. Metodę pomiaru uszkodzeń DNA poszczególnych komórek, opartą na technice mikroelektroforezy, opisali Ostling i Johanson w 1984 (Biochem. Biophys. Res. Commun. 123, 291-298). Komórki osadzone w agarozie poddaje się lizie, krótko poddaje działaniu pola elektrycznego, barwi fluorescencyjnym barwnikiem wiążącym DNA i ogląda pod mikroskopem fluorescencyjnym.
  2. Uszkodzone DNA migruje dalej w polu elektrycznym, a komórka przypomina wtedy „kometę” z jasno fluorescencyjną głową i ogonem, który zwiększa się wraz ze wzrostem uszkodzeń. Wykorzystaliśmy analizę obrazu wideo, aby zdefiniować odpowiednie „cechy” komety jako miarę uszkodzeń DNA, a także oszacowaliśmy uszkodzenia i naprawy za pomocą promieniowania jonizującego.
  3. Test został zoptymalizowany pod kątem roztworu do lizy, czasu lizy, czasu elektroforezy i stężenia jodku propidyny przy użyciu komórek V79 chomika chińskiego.  Aby ocenić niejednorodność odpowiedzi komórek prawidłowych w porównaniu z komórkami złośliwymi, oceniano uszkodzenie zarówno komórek nowotworowych, jak i komórek prawidłowych w obrębie  mysich guzów SCC-VII.
  4. Komórki nowotworowe oddzielono od makrofagów przy użyciu metody sortowania komórek opartej na zróżnicowanym wiązaniu  koziej  anty – mysiej  IgG sprzężonej z FITC . Najbardziej informacyjną cechą obrazu komety był „moment warkocza”, będący iloczynem ilości DNA w warkoczu i średniej odległości migracji w warkoczu.
  5. Komórki nowotworowe i normalne wykazywały znaczną niejednorodność uszkodzeń wytworzonych przez promieniowanie jonizujące, chociaż średnia wielkość uszkodzeń wzrastała liniowo wraz z dawką (0-15 Gy) i sugerowała podobną wrażliwość na promieniowanie netto dla tych dwóch typów komórek.
  6. Podobnie, szybkość naprawy DNA nie różniła się znacząco dla komórek nowotworowych i normalnych, a większość komórek naprawiła uszkodzenie po 30 minutach od ekspozycji na 15 Gy. Niejednorodność odpowiedzi nie wydawała się być wynikiem różnic w odpowiedzi w cyklu komórkowym.

Barwniki Alexa, seria nowych barwników fluorescencyjnych, które dają wyjątkowo jasne, fotostabilne koniugaty.

  1. Barwniki Alexa 350, Alexa 430, Alexa 488, Alexa 532, Alexa 546, Alexa 568 i Alexa 594 to nowa seria barwników fluorescencyjnych o widmach emisyjnych/wzbudzenia podobnych do widm AMCA, Lucifer Yellow, fluoresceiny, rodaminy 6G, tetrametylorodaminy lub Cy3, lizamina rodamina B i Texas Red, odpowiednio (liczby w nazwach Alexa wskazują przybliżoną maksymalną długość fali wzbudzenia w nm).
  2. Wszystkie barwniki Alexa i ich koniugaty są bardziej fluorescencyjne i bardziej fotostabilne niż ich powszechnie stosowane analogi spektralne wymienione powyżej. Ponadto barwniki Alexa są niewrażliwe na pH w zakresie 4-10.
  3. Oceniliśmy barwniki Alexa w porównaniu z konwencjonalnymi barwnikami w zastosowaniach z użyciem różnych koniugatów, w tym  koziej  anty – mysiej  IgG  (GAM), streptawidyny, aglutyniny z kiełków pszenicy (WGA) i konkanawaliny A (ConA). Koniugaty Alexa 546 są co najmniej dwukrotnie bardziej fluorescencyjne niż koniugaty Cy3.
  4. Białka znakowane barwnikami Alexa 568 lub Alexa 594 są kilkakrotnie jaśniejsze niż te same białka znakowane odpowiednio barwnikami lizamina rodamina B lub Texas Red. Pochodne barwnika Alexa falloidyny barwią F-aktynę z wysoką specyficznością. Formy hydrazydowe barwników Alexa są bardzo jasnymi, utrwalanymi w formaldehydzie znacznikami polarnymi.
  5. Koniugaty fluorochromów Alexa 430 (ex 430 nm/em 520 nm) i Alexa 532 (ex 530 nm/em 548 nm) są spektralnie unikalnymi sondami fluorescencyjnymi o stosunkowo wysokich wydajnościach kwantowych w zakresie długości fali wzbudzenia i emisji.

Synteza interleukin i IgA. Ludzka i mysia interleukina 6 indukują wysoki poziom wydzielania IgA w komórkach B zaangażowanych w IgA.

Świeżo wyizolowane mysie komórki PP B hodowano z 10 różnymi cytokinami, w tym IL-1 alfa, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IFN-gamma, TNF-alfa i TGF- beta, aby zbadać możliwą rolę tych cytokin w indukcji syntezy Ig. Interesujące było odkrycie, że tylko IL-5 i zarówno  mysi  rekombinant (mr), jak i ludzki rekombinant (hr) IL-6 wzmacniały syntezę IgA.

Efekt był większy z mrIL-6 lub hrIL-6 niż z mrIL-5. IL-6 indukował cykliczne komórki mIgA+ PP B do wydzielania wysokich poziomów IgA (około 7-krotny wzrost w porównaniu z kontrolą). Istotne było odkrycie, że mrIL-6 ma niewielki wpływ na wydzielanie IgM lub  IgG  przez hodowle komórek PP B. hrIL-6 zwiększyła również wydzielanie IgA przez komórki PP B, a to wzmocnienie zostało zniesione przez  kozie  anty -hrIL-6  antyserum. mrIL-6 nie powodował proliferacji komórek B, ale indukował gwałtowny wzrost liczby komórek B wydzielających IgA. Przełączanie izotypów nie było mechanizmem tego znacznego wzrostu syntezy IgA, ponieważ komórki B mIgA-PP nie były indukowane do wydzielania IgA przez mrIL-6. Na podstawie tych badań dochodzimy do wniosku, że IL-6 odgrywa ważną rolę w promowaniu końcowego różnicowania komórek PP B w komórki plazmatyczne wydzielające IgA.

Apoptoza złośliwych ludzkich komórek B przez ligację CD20 z przeciwciałami monoklonalnymi.

  • CD20 jest nieglikozylowaną fosfoproteiną o masie 33 do 37 kD zaangażowaną w sygnalizację komórek B, która pełni ważne funkcje w regulacji proliferacji i różnicowania komórek B.
  • Ponadto,  ostatnio wykazano, że ten antygen powierzchniowy komórek B jest skutecznym celem immunoterapii nowotworów złośliwych komórek B przy użyciu chimerycznych ( mysich /ludzkich) lub znakowanych radioaktywnie mysich przeciwciał  monoklonalnych anty  CD20  .
  • W tym raporcie pokazujemy, że rozległe usieciowanie CD20 za pomocą mysich przeciwciał monoklonalnych anty-CD20 (MoAb) w obecności koziego anty-mysiego IgG lub komórek z ekspresją receptora Fc (FcR) bezpośrednio hamuje proliferację limfocytów B, indukuje jądrowe DNA fragmentacja i prowadzi do śmierci komórki przez apoptozę.
  • Efekty apoptotyczne tych MoAb mogą być hamowane przez chelatację zewnątrzkomórkowego lub wewnątrzkomórkowego Ca2+ przez EGTA lub Bapta AM, co wskazuje, że  apoptoza za pośrednictwem anty -CD20 może być związana ze zmianami stężenia Ca2+.

 

Goat anti-Rat IgG (Fc) Coated Polystyrene Particles

RTPFC-60-5 Spherotech 5 mL 289 EUR

Goat IgG (Fc) fragment, purified

20011-1-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 250 EUR

Goat IgG (fc)-Biotin conjugate (isotype control)

20011-Fc-B Alpha Diagnostics 100 ug 164 EUR

Goat IgG (fc)-FITC conjugate (isotype control)

20011-Fc-F Alpha Diagnostics 100 ug 164 EUR

Goat IgG (fc)-HRP conjugate (isotype control)

20011-Fc-HP Alpha Diagnostics 100 ug 164 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc)

GAMG80Fc-0100 Equitech 100ml 404.3 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc)

GAMG80Fc-0500 Equitech 500ml 707.2 EUR

Mouse IgG (Fc) fragment, purified

20008-1-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 250 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG, unlabeled

40151-UL Alpha Diagnostics 1 mg 213 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc, 10MG

A008-10MG Arbor Assays 10MG 268 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc, 25MG

A008-25MG Arbor Assays 25MG 486 EUR

Mouse Anti-Goat IgG (Fc) Antibody

abx023336-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody

abx023402-5mg Abbexa 5 mg 495 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody

abx023405-2mg Abbexa 2 mg 439 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody

abx023407-2mg Abbexa 2 mg 411 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody

abx023543-1mg Abbexa 1 mg 523 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc-AP

LF-SA8001AP Abfrontier 1.0 ml 332 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc-BIOT

LF-SA8001B Abfrontier 1.0 mg 261 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc-FITC

LF-SA8001F Abfrontier 1.0 mg 261 EUR

Goat Anti-Mouse IgG Fc-UNLB

LF-SA8001U Abfrontier 1.0 mg 241 EUR

Goat anti Mouse IgG Fc (biotin)

43R-1358 Fitzgerald 2 mg 224 EUR

Gt anti-Hu IgG (Fc) Coated Blue Particles

HPBFC-30-5 Spherotech 5 mL 344 EUR

Rabbit IgG (Fc) Coated Fluorescent Particles

RGFcP5--10056-3 Spherotech 3 mL 3172 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-Biotin Conjugate

40151-BT Alpha Diagnostics 1 ml 225 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-FITC Conjugate

40151-FITC Alpha Diagnostics 1 ml 225 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) IgG-HRP Conjugate

40151-HRP Alpha Diagnostics 1 ml 225 EUR

Goat Anti-Human IgG FC

C020220-1mg Unibiotest 1mg 269 EUR

Goat Anti-Human IgG FC

C020220-50mg Unibiotest 50mg 6015 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc)

GAHG80Fc-0100 Equitech 100ml 404.3 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc)

GAHG80Fc-0500 Equitech 500ml 707.2 EUR

Goat anti Human IgG Fc

40-IG15 Fitzgerald 100 ml 352 EUR

Goat anti Rabbit IgG Fc

41C-CB1136 Fitzgerald 2 mg 249 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc

41R-1013 Fitzgerald 1 mg 188 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc

41R-1014 Fitzgerald 1 mg 207 EUR

Goat anti Human IgG Fc

41R-1125 Fitzgerald 1 mg 188 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-B9019R000-R0 Fitzgerald 10 ml 133 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-B9039G000-S2 Fitzgerald 10 ml 73 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1203GND0-D0 Fitzgerald 5 mg 192 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1203GND1-D0 Fitzgerald 10 ml 192 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1211G000-G4 Fitzgerald 10 ml 133 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1211G000-S4 Fitzgerald 10 ml 133 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1211G001-S4 Fitzgerald 10 ml 133 EUR

Goat anti Human IgG Fc

20-S1703GND1-D0 Fitzgerald 10 ml 203 EUR

Goat anti Human IgG Fc

70-B9039GA00-A0 Fitzgerald 5 mg 138 EUR

Goat anti Human IgG Fc

70-S1206GA00-A7 Fitzgerald 5 mg 192 EUR

Goat anti Human IgG Fc

70R-IG003 Fitzgerald 1 mg 291 EUR

Goat anti Pig IgG Fc

70R-IG007 Fitzgerald 1 mg 369 EUR

Goat anti Rabbit IgG Fc

70R-IG011 Fitzgerald 1.5 mg 378 EUR

Goat anti Rabbit IgG Fc

70R-IG017 Fitzgerald 2 mg 381 EUR

Human IgG (Fc) fragment, purified

20007-1-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 208 EUR

Rabbit IgG (Fc) fragment, purified

20009-1-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 250 EUR

Goat IgG (Fc)

31C-CH0504 Fitzgerald 2 mg 433 EUR

Goat IgG Fc

31R-1076 Fitzgerald 1 mg 381 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) IgG, unlabeled

10119 Alpha Diagnostics 1 mg 202 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) IgG, unlabeled

10119-2 Alpha Diagnostics 1 mg 225 EUR

Gt anti-Hu IgG (Fc) Coated Blue PMMA Particles

HPMAFc-30-5 Spherotech 5 mL 350 EUR

Goat Anti Mouse Igg (Fc) Polyclonal Antibody

CPBT-68074GM Creative Diagnostics 1 mg 663 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (Biotin)

abx023401-2ml Abbexa 2 ml 578 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (FITC)

abx023403-2mg Abbexa 2 mg 537 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (ALP)

abx023404-1ml Abbexa 1 ml 599 EUR

Goat Anti-Mouse IgG (Fc) Antibody (HRP)

abx023406-2ml Abbexa 2 ml 599 EUR

Sheep IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

7615-Fc Alpha Diagnostics 1 kit 712 EUR

Horse IgG-Fc ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

7715-Fc Alpha Diagnostics 1 kit 712 EUR

Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 10MG

A009-10MG Arbor Assays 10MG 268 EUR

Goat Anti-Rabbit IgG Fc, 25MG

A009-25MG Arbor Assays 25MG 486 EUR

Goat Anti-Human IgG Fc Antibody

20-abx134790 Abbexa
  • 258.00 EUR
  • 342.00 EUR
  • 100 ul
  • 500 ul

Goat Anti-Rabbit IgG (FC) Antibody

abx024171-2ml Abbexa 2 ml 606 EUR

Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody

abx023409-10mg Abbexa 10 mg 857 EUR

Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody

abx023410-5mg Abbexa 5 mg 495 EUR

Goat Anti-Rabbit IgG (Fc) Antibody

abx023411-2mg Abbexa 2 mg 370 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody

abx023507-10ml Abbexa 10 ml 551 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody

abx023509-2mg Abbexa 2 mg 328 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody

abx023510-10ml Abbexa 10 ml 370 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) Antibody

abx023511-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Goat anti-Cat IgG (Fc) Antibody

abx401190-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Goat anti-Chicken IgG (Fc) Antibody

abx401199-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Goat anti-Pig IgG (Fc) Antibody

abx401226-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Rabbit anti-Goat IgG (Fc) Antibody

abx401456-1mg Abbexa 1 mg 370 EUR

Goat Anti-Human IgG FC antibody

STJ99582-100l St John's Laboratory 100 µl 91 EUR

Goat Anti-Human IgG FC antibody

STJ99582-1mL St John's Laboratory 1 mL 514 EUR

Donkey Anti-Goat IgG Fc-HRP

LF-SA8069H Abfrontier 1.0 ml Ask for price

Rabbit anti Goat IgG Fc (biotin)

43R-1080 Fitzgerald 1 mg 285 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc (HRP)

43R-1082 Fitzgerald 1 mg 322 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc (rhodamine)

43R-1083 Fitzgerald 1 mg 263 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc (biotin)

43R-1086 Fitzgerald 1 mg 322 EUR

Rabbit anti Goat IgG Fc (HRP)

43R-1088 Fitzgerald 1 mg 339 EUR

Goat anti Human IgG, Fc (HRP),

43R-1624 Fitzgerald 1 mg 240 EUR

Goat anti Human IgG Fc (biotin)

43R-IG017bt Fitzgerald 1 ml 304 EUR

Goat anti Horse IgG Fc (HRP)

43R-IG041hrp Fitzgerald 2 ml 437 EUR

Goat anti Pig IgG Fc (HRP)

43R-IG056hrp Fitzgerald 1 mg 369 EUR

Goat anti Human IgG (Fc) + IgD

20-S5210G000-S4 Fitzgerald 10 ml 192 EUR

Dog IgG (Fc) fragment (isotype control, non-immune), purified

20016-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 250 EUR

Mouse anti IgG (Fc)

40R-1010 Fitzgerald 500 ug 565 EUR

Mouse anti IgG Fc

10-I17A Fitzgerald 1 mg 319 EUR

Goat Anti-Human IgG (Fc) IgG-HRP Conjugate

10119-HP Alpha Diagnostics 0.5 ml 213 EUR

Goat Anti-Cat IgG-Fc-IgG-HRP conjugate

71030-HP Alpha Diagnostics 0.5 ml 225 EUR

Goat Anti Mouse Igg (Fc) Polyclonal Antibody,FITC

CPBT-68072GM Creative Diagnostics 1 mg 741 EUR

Goat Anti-Mouse IgG, Fc Fragment, Antisera (Bulk)

40151-GAS-BLK Alpha Diagnostics 1-10L, bulk Ask for price

Rat IgG (Fc) fragment, purified (isotype control)

20005-1-FC Alpha Diagnostics 0.5 mg 250 EUR

Goat IgG (Fc) (FITC)

65C-CH0505 Fitzgerald 1 mg 345 EUR

Odkrycia te sugerują, że ligacja CD20 in vivo przez  przeciwciała anty – CD20  w obecności komórek z ekspresją FcR może inicjować zdarzenia transdukcji sygnału, które indukują podwyższenie [Ca2+]i i prowadzą do apoptozy złośliwych komórek B, przyczyniając się w ten sposób do imponującego regresje guza obserwowane w  modelach mysich  i badaniach klinicznych z użyciem  MoAb anty -CD20.

Dodaj komentarz